熒光定量PCR技術應用範圍

實時熒光定量PCR是一種在DNA擴增反應中，以熒光化學物質測每次聚合酶鏈式反應（PCR）循環後產物總量的方法。通過內參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。

實時熒光定量PCR是實驗室較常用的實驗，是一次由定性技術向定量技術的飛躍，運用該項技術，可以對DNA、RNA樣品進行相對定量、絕對定量和定性分析。實時熒光定量PCR技術以其特異性強、靈敏度高、重複性好、定量準確、速度快、全封閉反應等優點，提高了普通PCR技術的特異性和準確性，成為了分子生物學研究中的重要工具。

實時熒光定量PCR技術應用範圍：

１）目的基因相對表達差異分析（2-△△CT）；

２）miPNA檢測；

３）基因型分析；

４）轉基因生物（GMO檢測）；

５）細胞治療藥物組織分布檢測；

實時熒光定量PCR技術優勢：

１）靈敏度高，可以檢測低拷貝的目的基因；

２）高精度，PCR擴增階段包括3個階段：指數增長期、線性增長期和平台期、96個重複指數增長期表現出高精度，而平台期則變化差異較大；

３）定量能力強，簡單的流程就能得到高質量的定量數據；

４）動力學範圍寬，可以精確定量9個數量級的差異；

５）速度快，節省時間和勞力，不需要電泳檢測；

６）安全，使用熒光染料發光，不用EB或放射性物質，極大降低對實驗人員健康的威脅。