熒光定量PCR技術常用術語

熒光定量PCR技術廣泛用於分子生物學等領域。在了解熒光定量PCR如何對初始模板進行定量之前，需要了解幾個在熒光定量PCR分析中常用的術語：

基線：實時熒光定量PCR反應的基線是指在PCR的最初幾個循環中（一般為3-15個循環）的信號水平。此階段的熒光信號變化量極小。低水平的基線信號相當於反應的背景或噪聲。每個實時熒光定量PCR反應的基線應通過用戶分析或擴增曲線自動分析，根據經驗確定。基線的設置，會影響到熒光閾值及Ct值。

熒光閾值：熒光閾值是在熒光擴增曲線上人為設定的一個值，它可以設定在熒光信號指數擴增階段任意位置上，一般熒光閾值默認是PCR 3-15個循環熒光信號標準偏差的10倍。

Ct值：Ct值指的是PCR擴增過程中擴增產物的熒光信號達到設定的閾值時所經過的循環數。

標準曲線：標準曲線是標準物質的物理/化學屬性跟儀器響應之間的函數關係。對已知拷貝數的標準樣品做係列稀釋，對不同稀釋度的標準樣品進行熒光定量PCR並記錄Ct值，根據Ct值及拷貝數的對數繪製得到標準曲線，標準曲線的縱坐標代表起始拷貝數的對數，橫坐標代Ct值。