病理實驗組織前期處理注意事項

1.取材前期準備工作

1.1取材器械準備

準備一支 HB 鉛筆和一套取材器械。包括：組織剪、無齒鑷、刀柄及一次性手術刀片，標本的取材的編號一定要用鉛筆標注清晰，取材器械要鋒利，尤其手術刀片。

1.2固定液的選取

固定液需要根據標本的製作而選取不能一概而論，常用固定液有以下幾種：

①中性福爾馬林：是最常用的固定液之一，固定效果好為免疫組織化學最常用的固定液，對組織穿透性好，組織收縮小；

②多聚甲醛：該固定液適用於動物灌注固定取材，也可用於組織標本的較長時間保存、 光鏡及免疫組織化學實驗；

③甲醛：一般作為固定劑使用的， 10%的甲醛是用水和40%的甲醛（9:1）混合而成，實際上是4% 的甲醛溶液；

④植物組織固定液FAA：分為50%的FAA和70%的FAA，適用於一般的植物根、莖、葉、花藥、子房組織的固定及保存，在植物形態解剖研究上應用極廣。

⑤戊二醛電鏡固定液：戊二醛固定液的優點是對糖原、糖蛋白、微管內質網和細胞基質等有較好的固定作用。

1.3固定標本容器的選擇

有時容器瓶口過小，剛取完的組織偏軟可以放進去，等到固定好組織變硬無法取出標本， 由於過度牽拉而導致組織形態結構的；有時出現標本大小和固定液體積比例不合適，固定液過少導致組織固定不全，影響後期的實驗結果。

2.取材

固定要及時 主要取之於活組織檢查標本、動物模型組織標本、解剖標本均為新鮮組織夾取標本時用無齒鑷以免對組織造成人為損傷，如機體死亡2h以上的組織可能有不同程度的自溶，其抗原可能發生變性、消失或嚴重彌漫現象，因此需要快速固定處理以免影響免疫組織化學標記效果。

刀具要鋒利 防止人為因素影響切取標本是應用鋒利的刀剪。

大小適宜 一般標本取的組織塊厚度約為0.2~0.3cm，可根據性的略作調整，大小以1.5cm*1.5cm*0.2~0.3cm為宜，應於免疫組化的組織以1cm*1cm*0.2cm為好，不要太大，以免浪費試劑。

速度要快 取材時間要短，一些特殊的組織取材前要先灌注，比如腦組織。

特殊處理 取材應避免取過多壞死組織或凝血塊，組織上如果有血液、粘液、糞便等汙物要先處理幹淨在取材，以免影響後期切片。

3.組織固定

適宜的固定液-固定組織是要注意固定液的量，一般情況下要求固定液的量應為組織的10倍以上，大標本不少於8倍。

適宜的時間-大多數組織應該在固定24h內（不超過48h）進行取材，脫水，如果固定時間過長會影響後續實驗的結果（如免疫組化、免疫熒光，分子生物學、細胞遺傳等）。

適宜的取材-根據組織快的大小決定固定時間，一般厚度不超過0.3cm的情況下固定時間為3-24h（如果組織固定好未及時脫水處理應保存在70%的酒精裏）。

適宜的容器-固定的容器要相對大一些，防止固定後的組織大於容器難以取出，造成組織結構的破壞。

特殊組織的固定-肺、脂肪組織在固定的時候要用紗布或棉花把組織壓住，讓組織漂在固定液中間，得到充分的固定；胃、腸、皮膚等剖開的組織要先壓平在固定；腦組織要先灌注再取材。注：所有的組織後期如果要做免疫方麵的實驗盡量先灌注，以免紅細胞太多影響實驗結果的判讀。