PAS染色步驟及注意事項

PAS染色介紹

PAS染色法（Periodic Acid-Schiff stain）又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用來顯示糖原和其它多糖物質。糖原染色是病理學中常規的染色方法之一，MeManus 在1946年先使用PAS技術顯示黏蛋白，該法常用來顯示糖原和其他多糖，該染色液不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質，以及軟骨、垂體、黴菌、真菌、色素、澱粉樣物質、基底膜等。

PAS染色原理

過碘酸能使細胞內的多糖乙二醇基氧化成二醛，再與Schiff氏液的無色品紅結合，呈紅色，定位於胞漿上。

PAS染色應用

隨著醫學實驗技術的發展，糖原染色應用的範圍更加廣泛，如用以證明與鑒別細胞內空泡狀的性質，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究 ，糖尿病的診斷和研究，用於某些腫瘤的診斷等。除用於糖原的鑒定和黏液的顯示外，還可以觀察腎小球基底膜、結腸杯狀細胞中性黏液物質、阿米巴滋養體和黴菌的著色。臨床診斷、分類和治療提供了重要的依據

PAS染色步驟

1.石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-無水乙醇Ⅰ 6min-無水乙醇Ⅱ6min-95%酒精 6min-85%酒精 6min-75%酒精 5min-流水衝洗；

2.滴加過碘酸氧化10min；

3.自來水衝洗1次，再用蒸餾水衝洗2次；

4.滴加雪夫試劑10-20min，鏡下觀察；

5.流水衝洗10min；

6.蘇木素染核5min，流水衝洗；

7.分化液分化，流水衝洗返藍；

8.無水乙醇脫水，二甲苯透明；

9.中性樹膠封片。

結果判讀

糖原、中性粘液物質、軟骨基質、植物的真菌和細胞壁、上皮的基膜等均呈紫紅色，細胞核淺藍色。

注意事項

1.切片及脫蠟應該盡量幹淨，否則影響染色效果；

2.氧化劑氧化時間不宜過久，氧化時的溫度在18-22°C；

3.氧化劑和Schiff染色液應置於4℃密閉保存，使用時避免接觸過多的陽光和空氣。使用前，提前30min 取出恢複到在室溫後，避光暗處使用；

4.酸性分化液應經常更換新液，其分化時間應該依據切片厚蒲、組織的類別和酸性分化液的新舊而定，另外分化後自來水衝洗時間應該足夠；

5.在氧化劑和Schiff染色液中作用時間非常重要，該依據切片厚薄，組織的類別等決定；

6.本染色液常用於常規組織切片染色，對於真菌、細胞、極其薄的切片，建議采購糖原 PAS染色試劑盒(細胞真菌專用)，因為其氧化劑和蘇木素溶液濃度更低，不宜過染；

7.冷凍切片染色時間盡量要短；

8.為了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。

結果展示