Von Kossa硝酸銀法

簡 介：

鈣在人體內大量存在，構成骨骼作為支持人體的支架，在分泌、運送、肌肉收縮、神經傳導等也起重要作用。許多染料可以於鈣形成螯合物，包括茜素紅S、紅紫素、核固紅等。茜素紅S屬一種蒽醌類衍生物，是茜素磺酸鈉鹽，它能與碳酸鈣或磷酸鈣中的鈣鹽螯合形成橙紅色複合物。鈣鹽染色常用方法有硝酸銀法和茜素紅S法，鈣鹽染色試劑盒(Von Kossa硝酸銀法)原理在於該法是一種金屬置換法，硝酸銀溶液作用於含有不溶性鈣鹽的切片時，鈣被銀所置換，銀鹽在光的作用下被還原為黑色金屬銀，適用於大量樣本的鈣鹽組織染色。

操作步驟：

1、組織固定於10%中性福爾馬林，常規脫水包埋。

2、切片厚度5μm，常規脫蠟至水。

3、蒸餾水洗1min。

4、切片入Von Kossa硝酸銀溶液強光照射15-60min。

5、蒸餾水洗1min。

6、入海波溶液處理2min。

7、欧宝体育首页 液或Van Gieson複染細胞核。

8、常規脫水透明，中性樹膠封固。

陰性對照(可選)：

取另外一張連續切片脫蠟至水，置於Von Kossa對照液處理20min，流水衝洗5min.與實驗片一同入Von Kossa硝酸銀溶液，其餘步驟同上。

染色結果：

鈣鹽黑褐色至深黑色

細胞核根據複染液不同而不同

背景紅色

注意事項：

1.鈣鹽組織固定以中性福爾馬林為佳。

2.作用時間取決於陽光照射時光的強度和時間。

3.若暴露於紫外燈下，則應縮短照射時間，一般5-10min即可。

4.為了您的安全和健康，請穿實驗服並戴一次性手套操作。

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