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發布日期:2023/5/5 8:39:00來源://www.bjgszj.com/news939265.html
簡 介:
某些細胞如胃腸的杯狀細胞能分泌粘稠的分泌物,含有大量的糖稱粘多糖。中性粘液物質含有氨基己糖和遊離的己糖基,酸性粘液物質也含有氨基己糖並含有各種酸根。此方法先染阿利新藍染酸性粘液物質為藍色,並阻斷酸性粘液物質的羧酸分子中的乙二醇被高碘酸氧化生產二醛而著紅色。隻有中性粘液物質的乙二醇基被高碘酸生成二醛後與雪夫試劑中的無色品紅作用生成紅紫色複合物。
AB-PAS染色實驗步驟:
1.石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-無水乙醇Ⅰ 6min-無水乙醇Ⅱ6min-95%酒精 6min-85%酒精 6min-75%酒精 5min-流水衝洗;
2.阿利新藍染色液染10-20min;
3.蒸餾水水洗3次,1-2min/次;
4.加過碘酸溶液氧化5min,蒸餾水水洗3次,1-2min/次
5.滴加雪夫試劑室溫20min,鏡下觀察著色情況;
6.傾去雪夫試劑,流水衝洗10min;
7.蘇木素染細胞核5min,自來水衝洗;
8.酸性分化液分化,自來水衝洗返藍;
9.無水乙醇脫水,二甲苯透明;
10.中性樹脂封片。
染色結果判讀:糖原、中性粘液物質呈紅色,酸性粘液物質呈藍色,混合性粘液物質呈藍紫色,細胞核呈藍色。
注意事項:
1.脫蠟一定要徹底,否則影響實驗結果;
2.氧化劑氧化時間不宜過久,氧化時的溫度18-20℃;
3.酸性分化液應該經常換,分化時間根據切片的薄厚、液體的新舊而決定,另外分化後的自來水衝洗時間要足夠;
4.蘇木素染核要淡,以免影響陽性結果的觀察。
結果展示: