MASSON染色實驗步驟及注意事項

Masson染色實驗簡介與原理

實驗簡介：masson染色是指用兩種或三種陰離子染料混合，膠原纖維呈藍色，肌纖維呈紅色。用來顯示組織中纖維以及炎性因子的染色方法之一。

實驗原理：Masson氏染色時膠原纖維呈藍色(被苯胺藍所染)或綠色（被亮綠所染），肌纖維呈紅色(被酸性品紅和麗春紅所染)，這與陰離子染料分子的大小和組織的滲透性有關。如已固定的組織用一係列陰離子水溶性染料先後或混合染色，則可發現紅細胞被小分子的陰離子染料著染，肌纖維與胞質被中等大小的陰離子染料著染，而膠原纖維則被大分子的陰離子染料著染。由此說明了紅細胞對陰離子染料的滲透性小，肌纖維與胞質次之，而膠原纖維具有大的滲透性。根據組織不同的滲透性能，選擇分子大小不同的陰離子染料進行染色，便可把不同組織成分顯示出來。

二、Masson染色實驗步驟

step1：石蠟切片脫蠟至水。

Step2：鉻化處理或去汞鹽沉澱（甲醛固定的組織此步可略）。

Step3：依次自來水和蒸餾水洗。

Step4：用Regaud蘇木精染液或Weigert蘇木精液染核5-10min。

Step5：充分水洗,如過染可鹽酸酒精分化。

Step6：蒸餾水洗。

Step7：用Masson 麗春紅酸性複紅液5-10min。

Step8：以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

Step9：1%磷鉬酸水溶液分化3-5min。

Step10：不經水洗,直接用苯胺藍或光綠液染5min。

Step11：以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

Step12：95%酒精、無水酒精、二甲苯透明、中性樹膠封固。

實驗結果：膠原纖維呈綠色/藍色，肌纖維呈紅色，紅細胞呈桔紅色，細胞核為黑色。

三、Masson染色實驗注意事項

1．控製好染色步驟。

2．組織固定起著很重要的作用，根據不同的固定液可延長或縮短染色時間。

3．0.2%冰醋酸水溶液洗，可使色調清晰鮮豔。

4．磷鉬酸水溶液對麗春紅、酸性複紅有分化作用，分化時鏡下控製， 肌纖維和纖維素呈紅色，膠原纖維呈淡粉紅色即可。